Basis ynlieding
Erythrocyte lysate is ien fan 'e meast ienfâldige en maklike metoaden om reade bloedsellen te ferwiderjen, dat is, om reade bloedsellen te splitsen mei lysate, dy't gjin nukleêre sellen beskeadige en reade bloedsellen folslein ferwiderje kin. Lysate cleavage is in mylde metoade foar ferwidering fan reade bloedsellen, dy't benammen brûkt wurdt foar de skieding en suvering fan weefselsellen ferspraat troch enzyme spiisfertarring, de skieding en suvering fan lymfocyten, en it fuortheljen fan reade bloedsellen yn 'e eksperiminten fan weefselprotein en nucleic soere winning. De weefselsellen krigen troch de lysate fan reade bloedsellen befetsje gjin reade bloedsellen, en kin fierder brûkt wurde foar primêre kultuer, sel fúzje, flow cytometry, skieding en winning fan nucleic soer en aaiwyt, etc.
Ynstruksjes foar gebrûk
Tissue sel sample
1. Frisse weefsels waarden digested troch panko's / enzyme of kollagenase en ferspraat yn ien sel suspensie, en de supernatant waard ôfset troch centrifugation.
2. Nim ELS lysate út 'e kuolkast op 4â, add ELS lysate oan sel precipitate yn in ferhâlding fan 1: 3-5 (add 3-5ml fan lysate oan 1ml fan sel compacted), sêft blaze en mix.
3. Centrifuge by 800-1000rpm foar 5-8 minuten en smyt de boppeste reade dúdlike floeistof.
4. It precipitated part waard sammele en centrifuged mei Hank syn oplossing of serum-frije kultuer oplossing foar 2-3 kear.
5, as it kreakjen net kompleet/folslein is, kinne stappen 2 en 3 wurde werhelle.
6. Resuspension sellen foar folgjende eksperiminten; As RNA wurdt ekstrahearre, is it it bêste om dit te dwaan yn 'e oplossing taret út stap 4 mei DEPC-wetter
Reade bloedsellen hawwe in heul koarte libbenssyklus, mar 120 dagen, mar se reprodusearje bloed heul fluch, en yn dit gefal binne se benammen yn steat fan seldieling, en se binne de snelste dielende sellen fan allegear, dus dizze sel is heul weardefol, dus it is heul nuttich foar selkultuer. It is hiel simpel, it hat gjin organellen yn it, allinnich sel membranen en aaiwiten.